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谷氨酰胺合成酶檢測試劑盒檢測速度就是快！

谷氮酰胺合成酶，是衡量植物氮素同化水平的一項重要生理指標。谷氨酰胺這種氨基酸，不僅被細胞用來合成蛋白質，也是用來運輸氨的。自由的銨離子對生物有毒性，在血液中不能太多，但是一些生物過程又會產生游離的銨離子；所以就讓谷氨酰胺來運輸這些銨離子。當細胞需要運輸多余的銨離子的時候，就用銨離子和谷氨酸來合成谷氨酰胺，同時消耗ATP。谷氨酰胺合成酶催化的就是這個反應。這個反應分成兩步進行，酶先讓ATP和谷氨酸反應，生成γ-谷氨酰；接著銨離子上來，替換掉。在高等植物的研究中，GS也常被定義為植物氨同化所必需的酶。人谷氨酰胺合成酶叫做hGS。

測定原理
GS 在ATP 和Mg2+存在下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺進一步轉化為γ─
谷氨酰基異羥肟酸，在酸性條件下與鐵形成紅色的絡合物；該絡合物在540nm 處有大吸
收峰，可用分光光度計測定。

所需的儀器和用品
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、
研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制
提取液：100mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：10mL×1 瓶，-20℃保存。
試劑二：10mL×1 瓶，-20℃保存。
試劑三：粉劑×2 瓶，-20℃保存。用時每瓶加入5mL 蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑仍
-20℃保存。
試劑四：15mL×1 瓶，4℃保存。

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樣本測定的準備
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量
（104 個）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細菌或細胞加入1mL 提
取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30 次）；
8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，
加入1mL 提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。

產品優點如下：

1、快速簡便：操作時間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；
2、取樣量微：常規操作取樣量50l， 酶標儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請；
3、穩定性好：試劑盒2～8℃存放3個月有效；
4、再現性好：20倍稀釋線性仍然良好；
5、回收試驗： X =99%；
6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強；
7、測試面廣：可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養細胞以及細胞培養上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物，可以。

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